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1.紫外分光光譜UV 分析原理:吸收紫外光能量,引起分子中電子能級的躍遷 譜圖的表示方法:相對吸收光能量隨吸收光波長的變化 提供的信息:吸收峰的位置、強度和形狀,提供分子中不同電子結(jié)構(gòu)的信息 物質(zhì)分子吸收一定的波長的紫外光時,分子中的價電子從低能級躍遷到高能級而產(chǎn)生的吸收光譜較紫外光譜。紫光吸收光譜主要用于測定共軛分子、組分及平衡常數(shù)。 光線傳輸 光衍射 探測 數(shù)據(jù)輸出 2.紅外吸收光譜法IR 分析原理:吸收紅外光能量,引起具有偶極矩變化的分子的振動、轉(zhuǎn)動能級躍遷 譜圖的表示方法:相對透射光能量隨透射光頻率變化 提供的信息:峰的位置、強度和形狀,提供功能團或化學(xué)鍵的特征振動頻率 紅外光譜測試 紅外光譜的特征吸收峰對應(yīng)分子基團,因此可以根據(jù)紅外光譜推斷出分子結(jié)構(gòu)式。 以下是甲醇紅外光譜分析過程: 甲醇紅外光譜結(jié)構(gòu)分析過程 核磁共振波譜法NMR 分析原理:在外磁場中,具有核磁矩的原子核,吸收射頻能量,產(chǎn)生核自旋能級的躍遷 譜圖的表示方法:吸收光能量隨化學(xué)位移的變化 提供的信息:峰的化學(xué)位移、強度、裂分?jǐn)?shù)和偶合常數(shù),提供核的數(shù)目、所處化學(xué)環(huán)境和幾何構(gòu)型的信息 NMR結(jié)構(gòu) 進樣 樣品在磁場中 當(dāng)外加射頻場的頻率與原子核自旋進動的頻率相同時,射頻場的能量才能被有效地吸收,因此對于給定的原子核,在給定的外加磁場中,只能吸收特定頻率射頻場提供的能量,由此形成核磁共振信號。 核磁共振及數(shù)據(jù)輸出 質(zhì)譜分析法MS 分析原理:分子在真空中被電子轟擊,形成離子,通過電磁場按不同m/e的變化 提供的信息:分子離子及碎片離子的質(zhì)量數(shù)及其相對峰度,提供分子量,元素組成及結(jié)構(gòu)的信息 FT-ICR質(zhì)譜儀工作過程: 離子產(chǎn)生 離子收集 離子傳輸 FT-ICR質(zhì)譜的分析器是一個具有均勻(超導(dǎo))磁場的空腔,離子在垂直于磁場的圓形軌道上作回旋運動,回旋頻率僅與磁場強度和離子的質(zhì)荷比有關(guān),因此可以分離不同質(zhì)荷比的離子,并得到質(zhì)荷比相關(guān)的圖譜。 離子回旋運動 傅立葉變換 氣相色譜法GC 分析原理:樣品中各組分在流動相和固定相之間,由于分配系數(shù)不同而分離 譜圖的表示方法:柱后流出物濃度隨保留值的變化 提供的信息:峰的保留值與組分熱力學(xué)參數(shù)有關(guān),是定性依據(jù) 氣相色譜儀檢測流程: 氣相色譜儀,主要由三大部分構(gòu)成:載氣、色譜柱、檢測器。每一模塊具體工作流程如下。 注射器 色譜柱 檢測器 凝膠色譜法GPC 分析原理:樣品通過凝膠柱時,按分子的流體力學(xué)體積不同進行分離,大分子先流出 譜圖的表示方法:柱后流出物濃度隨保留值的變化 提供的信息:高聚物的平均分子量及其分布 根據(jù)所用凝膠的性質(zhì),可以分為使用水溶液的凝膠過濾色譜法(GFC)和使用有機溶劑的凝膠滲透色譜法(GPC)。 只依據(jù)尺寸大小分離,大組分最先被洗提出 色譜固定相是多孔性凝膠,只有直徑小于孔徑的組分可以進入凝膠孔道。大組分不能進入凝膠孔洞而被排阻,只能沿著凝膠粒子之間的空隙通過,因而最大的組分最先被洗提出來。 直徑小于孔徑的組分進入凝膠孔道 小組分可進入大部分凝膠孔洞,在色譜柱中滯留時間長,會更慢被洗提出來。溶劑分子因體積最小,可進入所有凝膠孔洞,因而是最后從色譜柱中洗提出。這也是與其他色譜法最大的不同。 依據(jù)尺寸差異,樣品組分分離 體積排阻色譜法適用于對未知樣品的探索分離。凝膠過濾色譜適于分析水溶液中的多肽、蛋白質(zhì)、生物酶等生物分子;凝膠滲透色譜主要用于高聚物(如聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯)的分子量測定。 |
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